Innehåll
- stadier
- Metod 1 Observera bakterierna direkt
- Metod 2 Mätning av biomassa
- Metod 3 Fortsätt med turbidimetri
Det finns flera sätt att mäta bakterietillväxt, och vissa är svårare att implementera. De enklaste används ofta och ger relativt noggranna resultat, förutsatt att de är rigorösa under mätningar. De vanligaste teknikerna är observation och räkning av bakterier, mätning av biomassa och torr biomassa och turbidimetri. Ditt skollaboratorium bör ha den utrustning som behövs för minst en av dessa metoder.
stadier
Metod 1 Observera bakterierna direkt
-
Förbered utrustningen. Förutom vad som vanligtvis finns i alla biologilaboratorier, behöver du vissa specifika artiklar. Se till att du har alla instrument och behållare till hands, så att du inte behöver gå fram och tillbaka i garderoben där utrustningen är förvarad. Tänk i förväg vad du kommer att göra för att veta vad du kommer att använda i varje steg. Du måste också känna till några viktiga termer.- Skaffa en hemacytometer. Det är ett blad med sifferkammare som är förknippat med ett mikroskop. Det är ett mycket enkelt instrument att justera och använda. Du kan hitta några från leverantörer som specialiserat sig på utrustning för skolor och forskningslaboratorier. En bruksanvisning tillhandahålls vanligtvis.
- Ta en petriskål. Detta är en liten, rund, grunt behållare där du kan observera bakterier.
- Termen "kultur" avser en mikroorganism som konstgjordes förökas som en del av ett vetenskapligt experiment.
- "Kulturbuljongen" är det medium där kulturen kommer att utvecklas.
-
Använd petriskålen. Lägg bakterierna i lådan och observera den under ett mikroskop. Du kan också lägga den direkt på en bild. Räkna sedan antalet närvarande bakterieceller. -
Se till att du har rätt koncentration. Om det finns för mycket bakterier kommer de att överlappa varandra och du kan inte räkna dem korrekt. Om detta är fallet, späd ut kulturen genom att blanda den med lite buljong. Om det är för få kommer resultatet inte att bli signifikant. Du måste sedan filtrera buljongen för att öka koncentrationen. -
Räkna bakterierna. Det sista steget är helt enkelt att räkna. Titta på räkenskammarna under mikroskopet och notera antalet celler du ser. Jämför resultatet med andra liknande upplevelser.
Metod 2 Mätning av biomassa
-
Kontrollera att du har de nödvändiga instrumenten. Denna metod är långsam att implementera och involverar användning av dyr utrustning. Om du inte tvättar det, använd en annan teknik. Å andra sidan, om laboratoriet du befinner dig har rätt verktyg, är mätningen av biomassa och torrmassa perfekt eftersom det ger exakta resultat. Du behöver:- en tvungen konvektionshydraulisk ugn,
- en aluminiumpanna,
- flera Erlenmeyer-kolvar,
- en centrifug eller ett laboratoriefiltreringssystem.
-
Kontrollera att grödan finns i en Erlenmeyer-kolv. Om detta inte är fallet, häll det in. I detta skede av experimentet finns bakterierna fortfarande i odlingsbuljongen. De kommer att separeras senare. -
Torka vågpannan. Placera det i ugnen för detta. Du kan också använda ett cellulosaacetatmembranfilter med en diameter på 47 mm med 0,45 mikrometer porer. Oavsett vilket verktyg som används, mät massan noggrant så att den kan dras från de resultat du får när grödan placeras på den. -
Mix. Skrika lerlenmeyer så att kulturen är homogen. På grund av tyngdkraften tenderar cellerna naturligtvis att falla till behållarens botten. Så du måste skaka lite för vilka distribueras på ett enhetligt sätt och att ditt prov är mer representativt. -
Centrifug. Med hjälp av centrifugen, separera bakterierna från odlingsbuljongen. Denna enhet används för att vrida behållaren och en motvikt i mycket hög hastighet. Buljongen flyter, vilket bara håller levande material. För mer information, hittar du information om hur du använder en centrifug på internet. -
Hämta degen. Släpp den på vägpannan. Du kan kasta kulturbuljongen, du behöver inte den längre, men håll lerlenmeyer till hands. -
Skölj centrifugen. Häll sköljvattnet på vägningspannan förutom bakteriecellerna. Resultatet för allt ger dig biomassa. -
Hitta den torra massan. För att känna till provets torra biomassa, placera vägningsskålen i ugnen inställd på 100 ° C under en period av 6 till 24 timmar, enligt instruktionerna som medföljde enheten. Var noga med att inte överskrida denna temperatur för att undvika brinnande bakterier. Väg sedan allt och dra sedan av massan på brickan.
Metod 3 Fortsätt med turbidimetri
-
Förbered din utrustning. Du behöver en ljuskälla och en spektrofotometer, en enhet som finns i de flesta vetenskapslaboratorier. Se den medföljande bruksanvisningen eftersom varje modell har sin egen funktion. Denna metod är en av de mest använda för att mäta bakterietillväxt, eftersom den endast kräver billiga och lättanvända verktyg. -
Få ljus in i kulturen. Turbiditet används för att utvärdera innehållet i en vätska i partiklar, det motsvarar för att bestämma om det är mer eller mindre molnigt. Resultatet du får från denna mätning kommer att ges i NTU (eller Nephelometric Turbidity Units). Det kan vara nödvändigt att utföra en kalibrering av anordningen för att exakt mäta provets turbiditet. -
Ta anteckningar. Turbiditet är mängden bakterier i provet. Spektrofotometern låter dig också känna till lösningens överföring (% T), vars värde är omvänt proportionellt mot grumligheten. Jämför sedan resultaten som erhållits på olika prover för att mäta bakterietillväxt.